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要做合適的選擇,必須對(duì)弱極性色譜柱有一定的認(rèn)識(shí)和了解

  當(dāng)被測(cè)物質(zhì)與弱極性色譜柱固定液的極性之間存在較大差異而手中又無(wú)適宜的色譜柱時(shí),在有些情況下是可以通過(guò)使用化學(xué)結(jié)構(gòu)與極性盡可能與被測(cè)物質(zhì)接近的色譜柱、合理的樣品處理、選用色譜條件、采用程序升溫等措施達(dá)到較好分離的目的。
 
  要做合適的選擇,必須對(duì)弱極性色譜柱有一定的認(rèn)識(shí)和了解:
 
  柱長(zhǎng),內(nèi)徑,如250*4.6mm。一般柱長(zhǎng)在2-250mm,柱越長(zhǎng),分離度越高,但柱壓更高,分離所需時(shí)間更長(zhǎng);但分離度與理論塔板數(shù)的平方根成正比,所以一昧增加柱長(zhǎng)并不是有效的分離手段,一般情況下,150mm、5um的填料可以提供足夠的塔板數(shù)。
 
  粒徑,影響色譜分離度。粒徑越小,分離越快,柱效越高,但柱壓力越高,柱容易被污染,導(dǎo)致柱壽命降低。常見(jiàn)分析柱通常使用5um填料,復(fù)雜的多組分樣品分離一般使用3.5um粒徑,更大內(nèi)徑的制備色譜柱通常使用更大的粒徑。如果固定相選擇是正確,但是分離度不夠,那么選用更小的粒度的填料是很有用的。3.5um填料填充柱的柱效比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3.5um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍,因此如何選擇填料粒徑需要根據(jù)現(xiàn)實(shí)情況而定。
 
  孔徑,60A,100A,120A,300A等??讖叫?,則含孔率高,比表面積大,載碳量高;色譜柱填料孔徑大小需和分子大小相匹配,保證分子自由進(jìn)出填料孔并與孔內(nèi)表面的鍵合相進(jìn)行分離分配,通常要求孔徑直徑是分子直徑的3倍以上,一般小分子使用80-120A,大分子使用300A。
 
  顆粒形狀,一般有球形和不規(guī)則形,當(dāng)使用黏度較大的流動(dòng)相時(shí),球形顆??梢越档椭鶋?,延長(zhǎng)色譜柱壽命。
 
  比表面積,指的是每克填料的表面積,如180m2/g-350m2/g,與粒度和含孔率有關(guān);比表面積大,會(huì)增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng),增加保留和分離度;比表面積小則可以縮短分析時(shí)間和平衡時(shí)間,并不是比表面積大或者小就更好,需要選擇合適的比表面積。
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